即用稀釋液,用于減少HAMA(人抗小鼠抗體)、類風濕因子、非特異性結合、交叉反應和基質效應引起的干擾。
免疫分析中的干擾可導致檢測中產生假陽性和假陰性結果,各種干擾日益普遍的原因有很多:
● 人口老齡化
● 越來越多的患者患有慢性自身免疫性疾病、過敏性和炎癥性疾病
● 現有分析方法的檢測水平限制
● 更多夾心分析法的應用
干擾可以根據其生化原因和對測定性能的影響分以下類:
1.病人樣本中抗體引起的干擾
例如患者樣本中的HAMA(人抗鼠抗體)、HAAA(人抗動物抗體)、嗜異性抗體和類風濕因子
2.樣本中內源性成份引起的干擾
例如白蛋白、補體、溶菌酶、纖維蛋白原、α-1抗胰蛋白酶、非典型性高脂、高鹽、高糖等
3.測定成份引起的干擾
測定成份如熒光或酶標記物,可以與樣本中的物質發生交叉反應或者改變檢測抗體的結合特性。
圖A: 沒有干擾的正常夾心分析結果→結果正確
圖B: 干擾抗體橋聯捕獲抗體和檢測抗體→假陽性結果
圖C: 干擾抗體與捕獲抗體結合→假陰性結果
圖D: Assay Defender?阻止干擾抗體結合→正確結果
Assay Defender?能夠有效地消除各種干擾,并有助于防止產生假陽性或假陰性結果。
Assay Defender?可以有效防止干擾樣品的假陽性結果
樣本1和樣本2是來自類風濕性疾病患者的血清樣本,用Elisa實驗檢測樣本中肝癌標記物hAxl,樣本3是來自健康供體的無干擾樣本。樣本用PBS-T/BSA, LowCross-Buffer, 市面上商業化HAMA阻斷劑1,2,3,以及Assay Defender稀釋,實驗發現單獨使用Assay Defender?可以完全消除干擾,因此在兩種干擾樣本中都能得到真正的陰性結果(<25 ng/mL)。無干擾樣本的結果不受Assay Defender?的影響。
Assay Defender?的使用
Assay Defender?可用于使用捕獲和(或)檢測抗體的免疫分析,特別適用于人或動物樣本中含有HAMA(人抗鼠抗體)或其他HAAA(人抗動物抗體)的免疫分析。
Assay Defender?是一款用于人體或者動物體液樣本的即用型稀釋液,使用簡單,直接用Assay Defender?替代以前的稀釋液即可。校準品也需用Assay Defender?稀釋。樣本稀釋比可以1:2或更高。大多數應用的有效稀釋比為1:10(1份樣本+9 份Assay Defender?)
Assay Defender?的使用示例
1. ELISA檢測
Assay Defender?替代普通樣本稀釋液。樣本與Assay Defender?至少1:2稀釋,若有可能1:10(1份樣本+9份Assay Defender?)
如果分析物濃度高,可用更高稀釋度。Assay Defender?作為樣本稀釋液也適用于免疫PCR和蛋白質芯片。
2. Lateral Flow Assay側向層析檢測
Assay Defender?替代流動緩沖液或淋洗液。
3. 帶樣本稀釋液的微球平臺
Assay Defender?替代普通樣本稀釋液,稀釋比取決于分析物的濃度。
4. 不帶樣本稀釋的微球平臺
Assay Defender替代捕獲和檢測微球的保存緩沖液。